Ako t -pruhovať (mikrobiológia)?
Aby sa eliminovala možnosť kontaminácie Petriho misky pri naočkovaní povrchu agaru do Petriho misky, musí byť očkovacia slučka sterilizovaná.
V prírode, baktérie sú nájdené na prakticky každom povrchu si možno predstaviť, a bohužiaľ len zriedka existujú v izolovaných populácií, ktoré obsahujú singulární druh baktérie. To predstavuje mikrobiológ sa zaujímavou výzvou získanie izolovaných kolónií z baktérií v spôsobe, ktorý je jednoduchý a rýchly. Trojsektorová séria alebo bežne označovaná ako „T-séria“ je základnou, ale zásadnou zručnosťou, ktorú mikrobiológ denne používa na izoláciu, identifikáciu a štúdium kolónií baktérií.
Časť 1 z 5: kresba t
- 1Prevráťte sa na zadnú stranu sterilnej Petriho misky obsahujúcej agar. Nakreslite čiaru začínajúcu mierne nad stredovým bodom. Pokračujte v kreslení čiary, kým nenarazíte na okraj zadnej dosky.
- 2Nakreslite ďalšiu čiaru začínajúc od ľavej strany zadnej dosky, kým nenarazíte na druhú stranu. Táto nová čiara by mala byť kolmá na pôvodnú čiaru a mala by ju pretínať v počiatočnom bode. Zadná doska Petriho misky by mala byť teraz rozdelená na tri sektory, ktoré sa budú javiť ako veľké „T“.
- 3Na zadný tanier Petriho misky označte príslušnými laboratórnymi informáciami, ako sú vaše iniciály, dátum, čas a zdroj kultúry.
Časť 2 z 5: sterilizácia očkovacej slučky
- Aby sa eliminovala možnosť kontaminácie Petriho misky pri naočkovaní povrchu agaru do Petriho misky, musí byť očkovacia slučka sterilizovaná.
- 1Začnite pripojením bunsenovho horáka k zdroju paliva a zapaľovaním.
- 2Vložte slučku do plameňa vo zvislom uhle. Cieľom je, aby očkovacia slučka bola mierne nad vnútorným modrým kužeľom plameňa. Držte ho tam niekoľko sekúnd.
- 3Odstráňte slučku z plameňa. V tomto mieste je slučka sterilná a extrémne horúca.
- Očkovacia slučka sa musí ochladiť, inak zvyškové teplo zabije všetky baktérie odobraté z kultúry.
- 4Očkovaciu slučku ochlaďte. Zdvihnite veko Petriho misky tak, aby ste vložili slučku. Dotknite sa vonkajšieho okraja živného agaru. Pri prvom kontakte by ste mali počuť prskajúci zvuk. Pokračujte v držaní očkovacej slučky proti povrchu niekoľko sekúnd.
- 5Vyberte očkovaciu slučku z Petriho misky. V tomto mieste sa nedotýkajte žiadneho iného povrchu, inak dôjde k opätovnej kontaminácii očkovacej slučky.
Zľahka potiahnite očkovaciu slučku cez živný agar smerom k druhému sektoru.
Časť 3 z 5: naočkovanie slučky kultúrou bujónu
- 1Držte sterilnú očkovaciu slučku. Otvorte zdroj svojej kultúry, napríklad kultúru vývaru.
- 2Vložte slučku do kultúry a krúžením obsahu zaistite rovnomernú distribúciu baktérií vo vnútri. Vykonajte to niekoľko sekúnd.
- 3Odstráňte slučku a obnovte pôvodnú vzorku.
Očkovaciu slučku zľahka potiahnite cez živný agar smerom k tretiemu sektoru.
Časť 4 z 5: naočkovanie slučky nanesenou kultúrou
- 1Vyberte kolóniu alebo časť vzorky.
- 2Odstráňte kryt z agarovej platne a oškrabte vybranú vzorku očkovacou slučkou.
- 3Nasaďte kryt taniera späť.
Časť 5 z 5: naočkovanie živného agaru
- 1Zdvihnite veko Petriho misky tak, aby ste vložili slučku. Začnite v hornom sektore písmena „T“ a zľahka pretiahnite očkovaciu slučku po povrchu živného agaru cik -cak. Je dôležité, aby ste sa držali v oblasti, v ktorej sa práve očkujete.
- 2Teraz, keď bol naočkovaný prvý sektor "t", sterilizujte očkovaciu slučku. Postupujte podľa metódy popísanej v časti Sterilizácia očkovacej slučky. Očkovaciu slučku na okraji živného agaru, ktorá nebola kontaminovaná pôvodnou kultúrou, nezabudnite ochladiť!
- 3Otočte Petriho misku o 90 stupňov a zdvihnite veko tak, aby ste vložili slučku.
- 4Začnite v prvom sektore. Zľahka potiahnite očkovaciu slučku cez živný agar smerom k druhému sektoru.
- 5Pokračujte do druhého sektora. Očkovaciu slučku zľahka pretiahnite cez živný agar cikcakovým vzorom.
- 6Teraz, keď bol naočkovaný druhý sektor "t", sterilizujte očkovaciu slučku. Postupujte podľa metódy popísanej v časti Sterilizácia očkovacej slučky. Očkovaciu slučku na okraji živného agaru, ktorá nebola kontaminovaná pôvodnou kultúrou, nezabudnite ochladiť!
- 7Otočte Petriho misku o 90 stupňov a zdvihnite veko tak, aby ste vložili slučku.
- 8Začnite v druhom sektore. Očkovaciu slučku zľahka potiahnite cez živný agar smerom k tretiemu sektoru.
- 9Pokračujte do tretieho sektora. Očkovaciu slučku zľahka pretiahnite cez živný agar cikcakovým vzorom.
- Bunsenov horák
- zápasy
- Zmiešaná kultúra (napr. Escherichia coli a Serratia Marcescens)
- Očkovacia slučka
- Sterilné Petriho misky obsahujúce živný agar
Prečítajte si tiež: Ako vyriešiť problém s časticou v krabici?
