Ako merať rast baktérií?
Najľahší spôsob, ako zmerať rast baktérií, je vložiť vzorku na čistú sklenenú dosku pod mikroskop a spočítať, koľko buniek baktérií existuje. Alternatívne môžete zmerať zákal, čo je množstvo baktérií vo vašej vzorke. Za týmto účelom si najskôr zaobstarajte svetelný zdroj a spektrofotometer, ktoré sú lacné a ľahko použiteľné, v obchode s potrebami pre vedecké laboratóriá. Potom posvieťte svetlom cez vzorku na spektrofotometer, ktorý vám poskytne hodnotu zákalu vzorky. Ak sa chcete dozvedieť, ako merať rast baktérií meraním mokrej a suchej hmoty, posuňte sa nadol!
Najľahší spôsob, ako zmerať rast baktérií, je vložiť vzorku na čistú sklenenú dosku pod mikroskop a spočítať, koľko buniek baktérií existuje.
Existuje mnoho spôsobov, ako merať rast baktérií, a niektoré sú zložitejšie ako ostatné. Aj keď obetujete určitú konzistentnosť svojich meraní, najjednoduchšie metódy sú dostatočne presné a bežne sa používajú. Najznámejšími metódami sú pozorovanie a počítanie baktérií, meranie vlhkej alebo suchej hmoty a meranie zákalu. Laboratórium vašej školy by malo mať vybavenie a zásoby na vykonanie aspoň jedného z týchto experimentov.
Metóda 1 z 3: Priame pozorovanie baktérií
- 1Zhromaždite svoje materiály. Okrem toho, čo je k dispozícii vo väčšine biologických laboratórií, existuje niekoľko špeciálnych nástrojov, ktoré by ste mali mať. Ak budete mať svoje nástroje a kontajnery v predstihu, umožní vám to dokončiť experiment bez toho, aby ste museli behať tam a späť do skrine. Je dôležité vedieť, na čo bude každý kus vpredu použitý. Mali by ste tiež vedieť niekoľko základných pojmov.
- Získajte počítaciu komoru. Tieto nástroje majú vstavanú komoru, sklíčko a mikroskop, takže sa dajú ľahko nastaviť a používať. Môžete si ich kúpiť v dodávateľských spoločnostiach pre laboratóriá a triedy. Dodávajú sa s pokynmi, ktoré vás prevedú celým procesom.
- Získajte vylievací tanier alebo tanier. Toto sú nádoby, v ktorých budete pozorovať baktérie.
- Kultúra je termín používaný na opis organizmu pestovaného umelo na experiment.
- Bujón je tekuté médium, v ktorom kultúra rastie.
- 2Nalejte alebo nalejte tanier. Baktérie môžete tiež umiestniť priamo na tanier a sledovať tak pod mikroskopom. Kultúru naneste na platňu a umiestnite pod mikroskop. Sledujte, koľko bakteriálnych buniek existuje.
- 3Uistite sa, že máte správnu koncentráciu. Ak je baktérií príliš veľa, budú sa prekrývať a nebudete mať presný počet. Kultúru zrieďte zmiešaním s ďalším vývarom. Ak je ich príliš málo, nebudete na presný počet stačiť. Bujón odfiltrujte pomocou filtračného systému alebo pridajte viac kultúry, ak ju máte k dispozícii.
- 4Spočítajte baktérie. Posledným krokom je ich fyzické spočítanie. Pozrite sa na lupu v počítacej komore a napíšte, koľko ich vidíte. Porovnajte to s inými testami.
Ako môžem zmerať rast baktérií na základnej škole?
Metóda 2 z 3: meranie vlhkej a suchej hmoty
- 1Uistite sa, že máte správne vybavenie. Zahŕňa to použitie drahého zariadenia a je to časovo náročné. Pokiaľ nie je vaše laboratórium vybavené správnym vybavením, zvážte vyskúšanie inej metódy. Ak však môžete, meranie vlhkej a suchej hmotnosti vám poskytne konzistentnejšie hodnoty. Budete potrebovať:
- Hydraulická gravitačná konvekčná rúra
- Hliníková vážiaca miska
- Sada baniek
- Odstredivka alebo laboratórny filtračný systém
- 2Uistite sa, že vaša kultúra je vo fľaši. Ak nie, nalejte ho do jedného. V tejto fáze by mal byť v bujóne, aj keď bude neskôr opäť oddelený.
- 3Vysušte hliníkovú misku na váženie v laboratórnej rúre. Alternatívou je filtračná membrána z acetátu celulózy, priemer 47 mm, veľkosť pórov 0,45 µm. Bez ohľadu na to, čo použijete, odvážte ho pred sušením, aby ste vedeli, koľko odčítať z vášho merania neskôr, keď na ňom budete mať bunky baktérií.
- 4Banku, do ktorej vložíte svoju kultúru, premiešajte, aby bola rovnomerne premiešaná. Bunky sa vplyvom gravitácie prirodzene potopia. Rozmiešajte ich, aby ste sa uistili, že sú vo fľaši rovnomerne rozložené. Tak získate reprezentatívnejšiu vzorku.
- 5Odstredivkou oddeľte bunky baktérií od bujónu. Tento nástroj rýchlo roztočí banku a protizávažie, vypustí vývar a opustí kultúru. Podrobnejší popis postupu nájdete v tejto príručke.
- 6Vymažte pastu a dajte ju na vážiacu misku. Zlikvidujte vývar. Už to nebudete potrebovať, ale banku budete potrebovať, takže sa jej držte.
- 7Odstredivku opláchnite a nalejte do panvice oplachovú vodu. Do buniek baktérií pridajte banku s oplachovou vodou. To vám dáva hmotnosť za mokra.
- 8Nájdite suchú hmotnosť. Na meranie suchej hmotnosti vložte panvicu do rúry a sušte pri 100°C 6 až 24 hodín podľa pokynov vašej konkrétnej rúry a/alebo vážiacej nádoby. Uistite sa, že nie ste prekročení tejto teploty, aby baktérie nespálili. Po dokončení procesu sušenia odvážte baktérie a nezabudnite odpočítať hmotnosť misky na váženie, aby ste získali suchú hmotnosť.
Ako použijem spektrofotometer na meranie rastu baktérií?
Metóda 3 z 3: meranie zákalu
- 1Získajte potrebné vybavenie. Budete potrebovať svetelný zdroj a spektrofotometer. Sú k dispozícii v obchodoch s potrebami vedeckých laboratórií. Spektrofotometer bude obsahovať pokyny na správne použitie modelu, ktorý ste si kúpili. Toto zariadenie je lacné a ľahko sa používa, takže je to jedna z bežnejších metód na meranie rastu baktérií.
- 2Posvieťte svetlom na vzorku. Laicky povedané, zákal je to, ako je vaša vzorka zakalená. Mali by ste dostať hodnotu zákalu, ktorá sa meria v NTU (Nefelometrické jednotky zákalu). Váš spektrofotometer môže prejsť určitou kalibráciou, než budete môcť presne zmerať zákal vzorky, preto si pred použitím prečítajte referenčný manuál výrobcu.
- 3Urobte si pár poznámok Zákal zodpovedá množstvu baktérií vo vzorke. Spektrofotometer vám tiež povie percento prenosu (%T). Toto číslo bude vyššie, ak je zákal nižší. Porovnajte svoje čísla z rôznych testov na meranie rastu baktérií.
Ak sa chcete dozvedieť, ako merať rast baktérií meraním mokrej a suchej hmoty, posuňte sa nadol!
- Pretože máte do činenia s kolóniami baktérií, urobte potrebné opatrenia, ako napríklad nosenie ochranných okuliarov a rukavíc. Možno budete chcieť nosiť aj protiprachovú masku, najmä ak si nie ste istí typom baktérií, ktoré kultivujete.
- Vykonajte predbežné opatrenia pri akomkoľvek druhu baktérií, aj keď to považujete za neškodné, a uistite sa, že všetky otvorené vredy, rezné rany a škrabance boli pred začatím úplne zakryté.
- Bakteriálny vývar, voda z vodovodu, voda z bazéna alebo z rybníka
- Sterilné médium, ako je agar
- Petriho misky
- Sterilné pipety
- Mikroskop (voliteľný)
- Počítacia komora
- Latexové rukavice
- Bezpečnostné okuliare
- Hydraulická rúra
Prečítajte si tiež: Ako zvládnuť hodinu matematiky?
Otázky a odpovede
- Ako môžem zistiť, či baktéria zomrela?Baktérie sú extrémne dynamický organizmus a v krátkom čase rastú exponenciálne. Ak nemôžete veľmi dlho detegovať pohyb alebo rast a/alebo ak je prostredie, v ktorom sa nachádza, nepriateľské voči špecifickému kmeňu baktérií, pravdepodobne zomrelo.
- Prečo meriame rast baktérií? Aký je význam merania rastu baktérií?Pomáha v prírode, medicíne a rôznych ďalších odvetviach. V prírode baktérie pomáhajú fixovať dusík v rastlinách a zlepšujú úrodnosť pôdy, trávenie celulózy a čistenie odpadových vôd. V medicíne používajú baktérie na výrobu liekov a vitamínových doplnkov. Iné odvetvia používajú baktérie na pečenie, prípravu alkoholických nápojov, výrobu syrov a jogurtov a vyčiňovanie kože a kože.
- Aká jednotka merania sa používa na počítanie baktérií?Jednotka počtu buniek závisí od použitej metódy. Ak sú baktérie spočítané na rastovej platni, najpoužívanejšou jednotkou počtu buniek sú jednotky tvoriace kolónie na mililiter (cfu / ml). Ak sa meria zakalením, neexistuje žiadna jednotka, pokiaľ nie je možné vypočítať cfu / ml meraním kontrolných sond.
- Existuje rastlina, ktorá dokáže merať baktérie?Neexistuje žiadna rastlina, ktorá by dokázala merať baktérie, iba moderné zariadenia dokážu detekovať baktérie vo všeobecnosti, nehovoriac o ich raste.
Nezodpovedané otázky
- Ako môžem zmerať rast baktérií na základnej škole?
- Ako môžem manipulovať s takými vecami, ako je pH v kultúrach? Ovplyvní pridanie chemikálií čitateľnosť výsledkov?
- Ako použijem spektrofotometer na meranie rastu baktérií?
- Ako môžem zmerať baktérie na úrovni základnej školy?
- Ako meriate zákal z Petriho misky? Aký postup mám použiť na prenos baktérií z misky do roztoku?
Komentáre (1)
- Robím vedecký projekt a to mi skutočne pomohlo v mojom výskume. Píšem citovaný pracovný hárok, aby som vám bol práve teraz vďačný. Odviedli ste skvelú prácu.
